هورمون تیروکسین(T4) هورمون عمده و مهم تیروئید در خون می باشد و بوسیله پروتئین های حامل که اصلی ترین آن ها TBG می باشد انتقال می یابد. قسمت عمده T4 در خون متصل به پروتئین ها بوده و  تنها در حدود 0.03 درصد آن به شکل آزاد می باشد(Free T4)، و در واقع همین شکل آزاد است که دارای فعالیت بیولوژیک بوده و روی سلولهای هدف مؤثر است. مقدار کل تیروکسین در خون (Total T4) بعنوان یک فاکتور مهم در بررسی وضعیت تیروئید مطرح می باشد اما به علت تغییر غلظت پروتئین های حامل در مواردی مثل بارداری، مصرف قرصهای ضد بارداری، استروژن درمانی و بیماریهای مرتبط با تیروئید مقدار‏‏ Total T4 نیز بطور کاذب دچار تغییر می گردد و این در حالیست که تیروئید دارای عملکرد طبیعی می باشد. همچنین در بعضی موارد با وجود عملکرد غیر طبیعی تیروئید (هیپو تیروئیدیسم و هیپر تیروئیدیسم) تغییرات بوجود آمده در غلظت TBG می تواند باعث ثبت نتایج نادرست در سنجش مقدار واقعی Total T4 شود. از این روی اندازه گیری غلظت Free T4 که غیر وابسته به عوامل فوق می باشد وضعیت و عملکرد غدة  تیروئید را بهتر نمایان می سازد و بعلاوه جایگزین بهتری بجای FTI می باشد.